RAW 264.7細(xì)胞(別名:RAW264.7、RAW-264.7等)是一種源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)腫瘤的小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞系,具有典型的巨噬細(xì)胞功能特性。該細(xì)胞系廣泛用于免疫學(xué)、炎癥反應(yīng)及腫瘤微環(huán)境研究,因其無(wú)需胰酶消化、易傳代的特點(diǎn),成為實(shí)驗(yàn)中常用的工具細(xì)胞。
種屬:小鼠(Mus musculus)
組織來(lái)源:Abelson病毒誘導(dǎo)的腫瘤;單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞起源
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng),禁用胰酶消化(胰酶會(huì)誘導(dǎo)分化)
細(xì)胞形態(tài):不規(guī)則形,存在少量分化細(xì)胞(屬正?,F(xiàn)象)
生物安全等級(jí):BSL-2(需在二級(jí)生物安全柜操作)
培養(yǎng)方案(默認(rèn)方案A)
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:DMEM([PM150210])
添加物:10% FBS([164210]) + 1% 雙抗(青霉素-鏈霉素,[PB180120])
無(wú)需額外成分:已包含細(xì)胞生長(zhǎng)所需全部營(yíng)養(yǎng),直接使用
氣體環(huán)境:空氣(95%)+ CO?(5%)
溫度:37℃
推薦傳代比例:1:2 至 1:8(根據(jù)細(xì)胞密度調(diào)整)
換液頻率:每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基
胰酶禁忌:嚴(yán)禁使用胰酶消化!胰酶會(huì)刺激細(xì)胞分化,建議用細(xì)胞刮刀輕柔吹打傳代。
傳代時(shí)效性:超過(guò)3天未傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞自發(fā)分化,需密切監(jiān)控密度。
分化現(xiàn)象:培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)少量分化細(xì)胞屬正常,無(wú)需過(guò)度處理。
凍存與復(fù)蘇:
凍存液配方:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 40% FBS + 5% DMSO
儲(chǔ)存條件:液氮(-196℃)長(zhǎng)期保存,避免反復(fù)凍融。
吞噬與抗原呈遞:可胞飲中性紅,吞噬乳膠顆?;蚪湍妇厶?,具備巨噬細(xì)胞典型功能。
免疫調(diào)控研究:LPS或PPD刺激后可誘導(dǎo)紅細(xì)胞分解,適用于炎癥信號(hào)通路(如TLR4)研究。
腫瘤微環(huán)境模型:用于模擬巨噬細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞相互作用,篩選免疫調(diào)節(jié)藥物。
細(xì)胞起源:由Abelson病毒誘導(dǎo)的小鼠白血病模型建立,表面抗原sIg?、Ia?、Thy-1.2?。
病毒安全性:XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性,無(wú)病毒顆粒分泌。
保藏信息:ATCC(TIB-71)、ECACC(91062702)權(quán)-威機(jī)構(gòu)保藏。
傳代步驟:
吸棄舊培養(yǎng)基,PBS輕洗1-2次。
加入適量新鮮培養(yǎng)基,用細(xì)胞刮刀輕柔刮取貼壁細(xì)胞,吹打分散后分瓶。
凍存技巧:
收集對(duì)數(shù)期細(xì)胞,離心后重懸于預(yù)冷凍存液,逐步降溫(-1℃/min)后轉(zhuǎn)入液氮。
復(fù)蘇要點(diǎn):
快速融化(37℃水浴),離心去除DMSO后重懸,避免過(guò)度吹打。
RAW 264.7細(xì)胞以其穩(wěn)定的巨噬細(xì)胞功能和便捷的培養(yǎng)特性,成為免疫與腫瘤研究中的理想模型。嚴(yán)格遵循無(wú)胰酶操作及傳代時(shí)效性,可最大限度維持細(xì)胞活性與功能。